| 帕金森病人α-synuclein基因第四号外显子单链构象的初步研究 邵明 刘焯霖 陶恩祥 陈彪 510080 广州，中山医科大学附属第一医院神经内科(邵明、刘焯霖、陶恩祥)；美国帕金森病研究所(陈彪) 关键词: 帕金森病的病因至今尚不十分清楚。研究表明在部分病人中，遗传因素起着重要的作用，尤其是家族性帕金森病，以常染色体显性方式遗传。Polymeropoulos等1996年在1个患家族性帕金森病的意大利大家族中将其致病基因定位在第四号染色体的4q21～23区间，不久他们就确定其致病基因是由于α-synuclein基因在第四号外显子上的1个错义点突变(G209A，GenBank IDL08850)所致，它使其编码的53位氨基酸由丙氨酸(Ala)置换为苏氨酸(Thr)，并在另外3个希腊的家族性帕金森病人得到证实，而在正常人中则未发现该突变。该发现为研究帕金森病的病因和发病机制提供了重要线索，同时也带来了以下疑问：是否所有显性遗传的家族性帕金森病以及大多数散发的帕金森病都与该基因突变或者该基因的其他突变有关?为此，我们选择了一组帕金森病人，进行了初步研究。 病例与实验方法：43例经中山医科大学附一院神经科帕金森专科门诊确诊的帕金森病人，年龄35～77岁。其中有家族史阳性的13例，50岁以前发病的有21例。取静脉血，按常规方法提取DNA。引物按Polymeropoulous报道序列合成(上游引物：5＇-GCTAATCAGCAATT-TAAGGCTAG-3＇，下游引物：5＇-GATATGTTCTTAGATGCTCAG-3＇)，常规聚合酶链反应(PCR)扩增，其产物长度为216 bp。PCR产物5 μl加10 μl去离子甲酰胺、溴酚蓝和二甲苯氰混合剂，97℃变性10分钟，立即置冰浴10分钟，加样于预先备好的8%的非变性聚丙烯酰胺，电泳(25℃、200 V、24小时)。电泳结束后银染。 结果与讨论：目前的研究认为帕金森病与遗传有关，但不起决定性作用。但对家族性帕金森病而言，遗传则起了关键的作用。帕金森病双生子的对照研究提示，早发病例与遗传关系密切，但对晚发病例遗传所起的作用似乎不大。因此，我们选择了21例50岁以前的发病的早发病例、13例有家族史阳性的以及16例无家族史的晚发病例进行研究。在上述PD病人和对照组中，所有聚合酶链反应扩增标本经单链构像多态(SSCP)分析，均未发现有单链泳动异常带出现，亦即无单链构象异常。该结果提示：在我们选择的病例中，我们所扩增的α-synuclein基因第四号外显子区域，包括Polymeropoulous等报道的G209A位点在内，不存在基因突变。该结果从另一个侧面提示了帕金森病因的复杂性。但是，我们的结果只是初步的，尚不知道在α-synuclein基因其他的外显子中有无突变，有必要进行深入研究。不管怎样，α-synuclein基因突变在帕金森病中的发现，对我们了解帕金森病的病因和发病机制均有非常重要的意义。 |
Archiver|帕金森病友之家 ( 粤ICP备10231723号 )
GMT+8, 2024-4-20 08:26 , Processed in 0.078182 second(s), 13 queries .
Powered by Discuz! X2.5
© 2001-2012 Comsenz Inc.
